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精米機(jī)對(duì)精米中4種發(fā)芽條件的研究
水稻中GABA含量的研究主要原料是糙米，糙米的口感影響人們的消費(fèi)。Z601是一種高胚率的米，其精米留肝率在80%以上。本研究以Z601 為原料，通過(guò)精米機(jī)等儀器進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)研究精米中GABA 含量與漫泡溫度、浸泡時(shí)間、發(fā)芽溫度、發(fā)芽時(shí)間4 種發(fā)芽條件的關(guān)系，為留胚精米的綜合利用和新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)提供理論參考。
材料與儀器
材料
留胚米Z601 國(guó)家梗稻工程技術(shù)中心；γ- 氨基丁酸 Sigma-Aldrich CoLLC；三氯乙酸、次氯酸鈉、醋酸鈉。天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠；甲醇(色i譜純)、乙睛(色譜純) Merck KGaA Darmstadt Germany；硫基乙醇 AMRESCO Inc；鄰苯二甲醛 生工生物(上海)工程有限公司。
儀器
高效液相色譜儀LC- lO ATVP：日本島津公司 Venusil MP-C" 色譜柱(4.6mm x 250mm) ；
TE214S 電子天平：賽多利科學(xué)儀器有限公司；
LTJM-2099精米機(jī)：杭州麥哲儀器有限公司；
;pHS-3C型pH計(jì)：天津盛邦科學(xué)儀器技術(shù)有限公司；
HYG恒溫?fù)u床：上海欣蕊自動(dòng)化設(shè)備有限公司；
HK-02A粉碎機(jī)：廣州旭朗機(jī)械設(shè)備有限公司；
SI-fB-3 型循環(huán)水式多用真空泵：鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；
針式過(guò)濾器：天津博納艾杰爾科技有限公司；
一次性使用無(wú)菌注射器( lmL)：上海治寧醫(yī)療器械有限公司。
實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 精米發(fā)芽工藝條件及操作要點(diǎn)工藝流程:原
料篩選→去皮成糙米→磨成精米→泊'毒→清洗→發(fā)芽→干燥→粉碎。
操作要點(diǎn):選取籽粒飽滿的稻米，去皮后用LTJM-2099精米機(jī)處理40s成為精米。為了抑制發(fā)芽后的發(fā)酵昧，用1%的次氯酸鈾水榕液洗lmin，用滅菌的去離子水反復(fù)沖洗3遍。將處理好的精米用紗布包好，恒溫浸泡，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中發(fā)芽，保持培養(yǎng)溫潤(rùn)，每到上下翻動(dòng)一次。發(fā)芽結(jié)束后將培養(yǎng)且放入55CC烘箱終止活性，干燥一定時(shí)間，取出粉碎。
1.2.2 GABA含量測(cè)定
樣品準(zhǔn)備:將粉碎后的樣品過(guò)60目篩，稱(chēng)取2g加入5%三氯乙酸水榕液5mL，30℃振蕩提取2h，離心(轉(zhuǎn)速10000r/min)lOmin，取上清液待測(cè)。
色譜條件:單泵，流速為0.9mL/min; 色譜柱為Venusil MP-C" (4.6 x 250mm) ，柱溫30 "C ;流動(dòng)相為1.6g NaAc .3H2O榕于600mL水中，pH7.2 甲醇200mL，乙氧200mL；檢測(cè)波長(zhǎng)338nm。
衍生化；吸取棚酸緩沖液(O.4mol/L，pH10.4)1000μL，樣品200μL，OPA 衍生試劑(OPA 80mg，β- 琉基乙醇80μL ，乙睛10mL) 200μL ，淚合均勻，暗室中室溫反應(yīng)5min后進(jìn)樣20μL。
GABA標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：用配制好的250mg/L的標(biāo)準(zhǔn)液分別稀釋50、40、30、20、10、6、5倍，柱前衍生，吸取20μL進(jìn)樣，重復(fù)三次，以GABA的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其它精米機(jī)： http://www.lsjy17.com/
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