精米機(jī)對精米中4種發(fā)芽條件的研究 水稻中GABA含量的研究主要原料是糙米,糙米的口感影響人們的消費(fèi)。Z601是一種高胚率的米,其精米留肝率在80%以上。本研究以Z601 為原料,通過精米機(jī)等儀器進(jìn)行實驗,響應(yīng)面實驗研究精米中GABA 含量與漫泡溫度、浸泡時間、發(fā)芽溫度、發(fā)芽時間4 種發(fā)芽條件的關(guān)系,為留胚精米的綜合利用和新產(chǎn)品的開發(fā)提供理論參考。 材料與儀器 材料 留胚米Z601 國家梗稻工程技術(shù)中心;γ- 氨基丁酸 Sigma-Aldrich CoLLC;三氯乙酸、次氯酸鈉、醋酸鈉。天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠;甲醇(色i譜純)、乙睛(色譜純) Merck KGaA Darmstadt Germany;硫基乙醇 AMRESCO Inc;鄰苯二甲醛 生工生物(上海)工程有限公司。 儀器 高效液相色譜儀LC- lO ATVP:日本島津公司 Venusil MP-C" 色譜柱(4.6mm x 250mm) ; TE214S 電子天平:賽多利科學(xué)儀器有限公司; LTJM-2099精米機(jī):杭州麥哲儀器有限公司; ;pHS-3C型pH計:天津盛邦科學(xué)儀器技術(shù)有限公司; HYG恒溫?fù)u床:上海欣蕊自動化設(shè)備有限公司; HK-02A粉碎機(jī):廣州旭朗機(jī)械設(shè)備有限公司; SI-fB-3 型循環(huán)水式多用真空泵:鄭州長城科工貿(mào)有限公司; 針式過濾器:天津博納艾杰爾科技有限公司; 一次性使用無菌注射器( lmL):上海治寧醫(yī)療器械有限公司。 實驗方法 1.2.1 精米發(fā)芽工藝條件及操作要點工藝流程:原 料篩選→去皮成糙米→磨成精米→泊'毒→清洗→發(fā)芽→干燥→粉碎。 操作要點:選取籽粒飽滿的稻米,去皮后用LTJM-2099精米機(jī)處理40s成為精米。為了抑制發(fā)芽后的發(fā)酵昧,用1%的次氯酸鈾水榕液洗lmin,用滅菌的去離子水反復(fù)沖洗3遍。將處理好的精米用紗布包好,恒溫浸泡,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中發(fā)芽,保持培養(yǎng)溫潤,每到上下翻動一次。發(fā)芽結(jié)束后將培養(yǎng)且放入55CC烘箱終止活性,干燥一定時間,取出粉碎。 1.2.2 GABA含量測定 樣品準(zhǔn)備:將粉碎后的樣品過60目篩,稱取2g加入5%三氯乙酸水榕液5mL,30℃振蕩提取2h,離心(轉(zhuǎn)速10000r/min)lOmin,取上清液待測。 色譜條件:單泵,流速為0.9mL/min; 色譜柱為Venusil MP-C" (4.6 x 250mm) ,柱溫30 "C ;流動相為1.6g NaAc .3H2O榕于600mL水中,pH7.2 甲醇200mL,乙氧200mL;檢測波長338nm。 衍生化;吸取棚酸緩沖液(O.4mol/L,pH10.4)1000μL,樣品200μL,OPA 衍生試劑(OPA 80mg,β- 琉基乙醇80μL ,乙睛10mL) 200μL ,淚合均勻,暗室中室溫反應(yīng)5min后進(jìn)樣20μL。 GABA標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:用配制好的250mg/L的標(biāo)準(zhǔn)液分別稀釋50、40、30、20、10、6、5倍,柱前衍生,吸取20μL進(jìn)樣,重復(fù)三次,以GABA的濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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